1） 抗体发现:

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在初步筛选后直接以scFv的分子形式进行表达。

  • 因为抗体分子在CAR-T开发中的作用角色是靶向工具，所以在选择scFv或sdAb候选抗体时，亲和力是首要考虑因素。因此我们将亲和力排序步骤前置。

  • 特异性检测可根据客户要求进行。

  • CAR-T细胞的功能应该在得到CAR-T产品后进行验证，而不需要对scFv或sdAb本身进行功能验证


2） CAR结构设计：

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3） CAR基因包装和递送：

针对设计的CAR基因修饰T细胞，我们的科学家灵活地采用多种方法将CAR构建到T细胞中，如包装和基于病毒的转染方法。 由于CAR-T细胞的成功制造很大程度上依赖于T细胞受体(TCR)基因转移，这种T淋巴细胞的基因修饰是产生优秀的CAR-T细胞的最关键步骤之一。 由于T细胞的高毒性和低效率，使用脂质car T质粒转染等非病毒方法很难对T细胞进行修饰，但电穿孔转染和转座子转染系统能够更加稳健地完成T细胞的转染。

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4） CAR-T细胞培养

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5） 体外药效学分析：

  • CAR表达测试

  • 细胞因子释放

  • 体外杀伤活性

  • CAR细胞增殖分析

  • 活性和生物分布分析

 

6） 体内药效学分析

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